خالص سازی و بررسی خواص سینتیکی آنزیم هیستامیناز از گونه خلر ( Lathyrus sativus ) با استفاده از کروماتوگرافی تعویض آنیون

Authors

  • جاوید نیا , کتایون مرکزتحقیقات شیمی و فراورده های دارویی دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران
  • خلیقیان, نجمه مرکزتحقیقات شیمی و فراورده های دارویی دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران
  • خونساری, آزاده مرکز تحقیقات داروهای گیاهی رازی، دانشگاه علوم پزشکی لرستان، خرم آباد، ایران
  • نعمتی, شیما مرکز تحقیقات داروهای گیاهی رازی، دانشگاه علوم پزشکی لرستان، خرم آباد، ایران
Abstract:

Background : The histamine poisoning directly correlates to improper preservation of foods. Diamine oxidase catalyses the oxidative deamination of histamine and other biogenic amines such as cadaverine and putrescine. Plant diamine oxidases are of widespread occurrence in Leguminaceae such as Cicer arietinum, Lathyrus sativus and Vigna radiata. For this reason, this study was carried out to examine purification and enzyme kinetic properties of histaminase from the Lathyrus sativus seedling. Materials and Methods: The purification of histaminase was according to the method given by Federico et al., with some modifications. In short, using ammonium sulfate precipitation of proteins, dialysis against potassium phosphate buffer 50mM, pH=7 over night, concentrating via dialysis bag and PEG, loading on DEAE52-sephadex column previously equilibrated with 15 mM potassium phosphate buffer pH=5.5 containing 1 µmol CuCl2 and finally enzyme eluted by increasing the NaCl concentration to 0.2 M. The homogenicity of enzyme was confirmed by SDS-PAGE in each step and diamine oxidase activity was determined by a spectrophotometer. Results: The specific activity of the final purified enzyme was recorded at 50 U/mg protein for histamine substrate and enzyme kinetic properties of this enzyme (Km=2.5 mM, Vmax=3.05), and the homogenicity of purified enzyme by SDS-PAGE at 72 kDa region were indicated. Conclusion: Overall, the herbal histaminase as a new enzyme in prevention of histamine poisoning is promising.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

خالص سازی و بررسی خواص سینتیکی آنزیم هیستامیناز از گونه خلر ( lathyrus sativus ) با استفاده از کروماتوگرافی تعویض آنیون

مقدمه: مسمومیت با هیستامین به طور مستقیم در ارتباط با نگهداری نامناسب غذاها می باشد. دی آمین اکسیداز، دآمیناسیون اکسیداتیو هیستامین و آمین های بیوژنیک دیگر مانند کاداورین و پوترسین را کاتالیز می کند. دی آمین اکسیدازهای گیاهی پراکندگی زیادی در خانواده لگومینه مانند نخود، خلر و ماش دارند. به این دلیل، این مطالعه انجام گرفت تا خالص سازی و خواص کینتیکی آنزیم هیستامیناز از جوانه های خلر آزمایش گردد....

full text

اثر سرب و مس بر برخی صفات فیزیولوژیکی گونه گیاهی خلر (Lathyrus sativus)

این تحقیقبه منظور بررسی اثرات سرب و مس بر گونه گیاهی خلر در خاک های آلوده به این عناصرصورت پذیرفت. بر این اساس به منظور برآورد و شناسایی توانایی گیاه خلر نسبت به عناصرسنگین سرب و مس آزمایشی در پاییز 1387 بر خلر(Lathyrussativus) رقم زنجان  انجام شد. این آزمایش به صورت فاکتوریلو در قالب طرح کاملا تصادفی انجام شد. که در این راستا از چهار سطح سرب (2 Pb(NO3)) 0، 200، 400 و800 میلی گرم بر  کیلوگرم خا...

full text

استفاده از مدل ضرب‌پذیر تغییریافته در جدا‏پذیری اثرات ژنوتیپی در خلر (Lathyrus sativus L.)

در اغلب آزمایش‏های مقایسۀ رقم‌ها، اثر متقابل ژنوتیپ × محیط پیچیده است و اثرگذاری ژنوتیپی و محیطی جدا‏پذیر نیستند. مدل ضرب‌پذیر تغییریافته یک ابزار تحلیلی توانمند برای جدا‌پذیری اثرگذاری ژنوتیپی از اثرگذاری محیطی، جدا‌پذیری اثرگذاری محیطی از اثرگذاری ژنوتیپی و جداسازی کامل را فراهم می‌کند. در این بررسی ده رگۀ (لاین) امیدبخش خلر (Lathyrus sativus L.) به همراه تودۀ بومی نقده (به‌عنوان شاهد) در ایس...

full text

تعیین درجه‌حرارت‌های کاردینال جوانه‌زنی بذر خلر (Lathyrus sativus L.)

دماهای کاردینال (کمینه، بهینه و بیشینه) در انتخاب اقلیم مناسب برای کاشت و زمان کاشت نقش مهم و تعیین کننده­ای دارند، و ارزیابی دماهای کاردینال برای جوانه­زنی گیاهان می­تواند برای انجام بهتر و به موقع بذرکاری در مزارع تعیین­کننده باشد. جهت تعیین دماهای کاردینال جوانه­زنی خلر، آزمایشی در قالب طرح کاملاً تصادفی با 4 تکرار در دانشکده کشاورزی دانشگاه بیرجند انجام شد. بذور در دماهای 5، 10، 15،20، 25، 3...

full text

The effect of cyclosporine on asymmetric antibodies and serum transforming growth factor beta1 in abortion-prone model of mice CBA/J x DBA/2

كچ ي هد فده و هقباس : ي ک ي طقس زورب للع زا اه ي ،ررکم ا لماوع تلاخد ي ژولونوم ي ک ا رد ي ن قم طققس عون ي وراد دقشاب ي س ي روپسولک ي ،ن ح لدم رد طقس شهاک بجوم ي ناو ي CBA/j×DBA/2 م ي تنآ ددرگ ي داب ي اه ي ان و راققتم TGF-β لماوع زا عت مهم يي ن گلماح تشونرس هدننک ي سررب روظنم هب رضاح هعلاطم تسا ي ات ث ي ر اس ي روپسولک ي ن م رب ي از ا ي ن تنآ عون ي داب ي س و اه ي اکوت ي ن TGF...

full text

بررسی فعالیت آنزیمی کاتالاز و گلوتاتیون پراکسیداز تحت سمیت سرب و مس در گونه خلر (Lathyrus sativus)

برخی گیاهان قادر به جذب و تجمع مقادیر کافی از بعضی فلزات سنگین و سمی هستند. اگرچه فلزات سنگین در ایجاد تنش اکسیدی در گیاهانمشارکت دارند، اما گیاهان دارای مکانیسم های تدافعی مختلفی در برابر سمیت این عناصر هستند. یکی از این مکانیس مها فعال سازی آنزیم هایآنتی اکسیدان به منظور محافظت در مقابل آسیب های اکسیدی ناشی از فلزات سنگین است. هدف از مطالعه حاضر شناخت تغییرات آنزیمی کاتالاز و گلوتاتیون پراکسی...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 14  issue None

pages  31- 42

publication date 2012-07

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023